Prietenii care fac experimente legate de celule trebuie să folosească adesea metode de înghețare a celulelor. Pe scurt, depozitarea înghețată a celulelor este de a salva celulele într-un mediu cu temperatură scăzută pentru a atinge scopul conservării pe termen lung. Celulele vor avea un anumit grad de mutație în timpul procesului de transmitere. Pentru a se asigura că celulele pot fi încă utilizate în cazul poluării și mutațiilor celulare, unele celule sunt de obicei folosite pentru înghețare.
Principiul celulei înghețate
Un principiu în procesul de înghețare și recuperare a celulelor este „fuziunea înghețată lentă” pentru a salva vitalitatea celulelor la maximum. Mai simplu spus, trebuie să fie lent când este înghețat și se răcește și trebuie încălzit rapid când este recuperat de la temperatură scăzută. Motivul pentru înghețarea lentă este că, dacă celulele sunt plasate direct într-un mediu cu temperatură ultra joasă, cum ar fi azotul lichid, celulele formează un cristal de gheață mare, care va deteriora celulele.
Dacă îl îngheți încet, celulele pot fi deshidratate lent pentru a atinge scopul de a proteja celulele. În plus, atunci când se recuperează, este, de asemenea, pentru a preveni formarea de cristale de gheață mici de cristale mari de gheață, adică cristalele grele ale cristalelor de gheață. Prin urmare, atunci când toată lumea îngheață de obicei celulele, aceasta provoacă întotdeauna pierderi celulelor, ceea ce este probabil să aibă un impact în etapa de înghețare.
Mai multe metode de congelare a celulelor
Metoda manuală: Celula congelată este de obicei depozitată în azot lichid. Metoda de operare manuală este de a răci gradientul în frigider. Păstrați celulele în tubul de depozitare congelată și puneți-le într-un mediu frigorific de 4 grade C, -20 grade C, -80 grade C în ordine. Congelat timp de 24 de ore la -80 grade C înainte de a fi transferat în azot lichid. Răcirea manuală nu necesită suplimente suplimentare de alte consumabile. Poate fi acţionat manual. Este cel mai simplu, dar nu este simplu. Operațiunea propriu-zisă este supărătoare. Și efectul nu este foarte bun, deoarece această metodă de răcire nu este încă uniformă și nu este neapărat aplicabilă pentru celulele mai fragile.
Cutie de răcire cu gradient: Cutia de răcire cu gradient vândută pe piață este utilizată special în răcirea uniformă a procesului de congelare. Viteza de răcire este de obicei de -1 grade/minut. Puneți tubul de depozitare înghețat în cutia de răcire cu gradient și plasați cutia de răcire cu gradient direct în mediul frigiderului de -80 grade C pentru a petrece noaptea fără operarea manuală a gradientului. Coborâți apoi tubul de depozitare și puneți-l în azot lichid. Efectul utilizării cutiilor de răcire cu gradient este mai bun, deoarece cutiile de răcire comerciale de pe piață pot asigura o rată de răcire aproximativ uniformă.
Există două cutii de răcire cu gradient comune pe piață. Nevoia de a adăuga izopropil, de obicei un corp de cutie de PC. Când este utilizat, adăugați izopenol la linia de scalare din cutie atunci când îl utilizați. Izopropanolul este folosit ca purtător pentru stocarea și distribuția căldurii.
Un alt tip nu trebuie adăugat cu izopropil, spumă, iar congelatorul poate fi plasat direct în timpul utilizării, ceea ce este mai convenabil de operat.
Cutia de răcire a izopropanolului este recomandată pentru a înlocui lichidul după ce a fost folosit de mai multe ori, dar deoarece izopropanolul este un lichid dăunător, care dăunează experimentelor și mediului, acesta poate fi de obicei folosit de mai multe ori. Cu toate acestea, este necesar să vă asigurați că lichidul este într-o anumită cantitate.
Depozitare congelată neprogramată: Folosiți lichide congelate fără program care pot fi achiziționate de pe piață. În comparație cu lichidul înghețat tradițional, componenta internă poate reduce deteriorarea celulelor cristalului de gheață, astfel încât să nu fie nevoie să folosiți gradientul pentru a se răci și nici nu necesită cutia de răcire cu gradient. Depozitarea congelată poate fi plasată direct într-un mediu frigorific de -80 grade C.
Multe probe de celule sunt foarte prețioase. Pe lângă noi, trebuie să-l folosim atunci când facem experimente. De asemenea, trebuie să alegeți produse bune cât mai mult posibil în selecția de produse aferente. Selectați tubul de depozitare înghețat cu o calitate calificată, încercați să utilizați instrumentul de răcire cu gradient pentru congelare și maximizați garanția de deteriorare redusă a celulelor pentru a evita pierderile mici din cauza minorelor.