Cunoștințele microbiene pe care le doriți
Microorganismele sunt un grup de organisme minuscule care există pe scară largă în natură și sunt invizibile cu ochiul liber și trebuie mărite de sute, mii sau chiar zeci de mii de ori cu ajutorul unui microscop optic sau al unui microscop electronic. Au avantajele dimensiunilor mici, structurii simple, reproducerii rapide, variației ușoare și capacității puternice de adaptare la mediu.
Clasificarea microorganismelor:
Există multe tipuri de microorganisme, cel puțin mai mult de 100,000 tipuri. În funcție de structura lor, compoziția chimică și obiceiurile de viață și alte diferențe pot fi împărțite în trei categorii.
Nucleul celulei microbiene eucariote are un grad mai mare de diferențiere, incluzând membrana nucleară, nucleol și cromozomi; citoplasma are organele complete (cum ar fi reticulul endoplasmatic, ribozomul și mitocondriile etc.). Ciupercile aparțin acestui tip de microorganisme.
Celulele microbiene procariote au un grad scăzut de diferențiere nucleară, doar nucleoplasmă primitivă, fără membrană nucleară și nucleol; organele nu sunt foarte complete. Există multe specii de astfel de microorganisme, inclusiv bacterii, spirochete, micoplasme, rickettsia, chlamydia și actinomicete.
Microorganismele acelulare nu au o structură celulară tipică și nici un sistem enzimatic care să genereze energie și pot crește și se reproduce doar în celulele vii. Virușii aparțin acestui tip de microorganisme.
Separarea și purificarea microorganismelor
O cultură microbiană care conține mai mult de o specie se numește cultură mixtă. Dacă toate celulele dintr-o colonie sunt derivate dintr-o celulă parentală, atunci colonia se numește cultură pură. În identificarea speciilor bacteriene, microorganismele utilizate sunt, în general, necesare să fie culturi pure. Procesul de obținere a culturii pure se numește separare și purificare și există multe metode.
1. Metoda turnării plăcii
Mai întâi, suspensia microbiană este diluată într-o serie și o anumită cantitate din diluție este complet amestecată cu mediul de agar nutritiv dizolvat menținut la aproximativ 40-50 grade, apoi amestecul este turnat într-o cutie Petri sterilă. După solidificare, placa a fost incubată cu capul în jos într-o cameră constantă. O singură celulă este înmulțită pentru a forma o colonie, se ia o singură colonie pentru a face o suspensie și pașii de mai sus se repetă de mai multe ori pentru a obține o cultură pură.
2. Metoda de acoperire a plăcii plate
Mai întâi, suspensia microbiană este diluată corespunzător și o anumită cantitate din diluție este plasată pe o placă de agar nutrient steril care s-a solidificat, apoi diluția este răspândită uniform pe suprafața mediului cu o spatulă sterilă de sticlă. O singură colonie poate fi obținută prin incubare la o temperatură constantă.
3. Metoda de marcare a plăcii
Cel mai simplu mod de a izola microorganismele este striatul. Se strecoară o cantitate mică de cultură pe placă folosind o buclă sterilă. Există multe metode de scriere. Metodele obișnuite de scriere care sunt mai probabil să apară într-o singură colonie sunt metoda slash, metoda curbei, metoda pătratului, metoda radiației și metoda celor patru grile. Când bucla de inoculare se mișcă înapoi pe suprafața mediului, lichidul bacterian de pe bucla de inoculare este diluat treptat și, în final, o singură celulă este împrăștiată pe linia trasată. După cultură, fiecare celulă crește într-o colonie.
4. Metoda culturii de îmbogățire
Metoda și principiul metodei culturii de îmbogățire sunt foarte simple. Putem crea condiții care să permită doar microbilor doriti să crească, iar în aceste condiții microbii doriti pot concura efectiv cu alți microbi și pot depăși cu mult alți microbi în ceea ce privește capacitatea de creștere. Dacă unii paraziți obligați urmează să fie izolați, probele trebuie inoculate în populațiile corespunzătoare de celule gazdă susceptibile pentru a crește în număr mare. Bacteriile parazitare pure pot fi obținute prin însămânțare repetată.
5. Metoda anaerobă
În laborator, pentru a izola unele bacterii anaerobe, o eprubetă care conține mediul original poate fi folosită ca vas de cultură, iar eprubeta poate fi încălzită într-o baie de apă clocotită timp de câteva minute pentru a elimina oxigenul dizolvat din mediu. . Apoi se răcește rapid și se inoculează. După inoculare, s-a adăugat parafină sterilă la suprafața mediului pentru a izola mediul de aer. O altă metodă este înlocuirea gazului din mediu cu N2 sau CO2 după inoculare și apoi etanșarea gurii eprubetei peste o flacără. Uneori, pentru a izola mai eficient unele bacterii anaerobe, proba izolată poate fi inoculată pe mediu, iar apoi placa Petri poate fi plasată într-un dispozitiv de cultură anaerobă complet etanș.
6. Metoda de izolare cu o singură celulă (sau cu un singur spor).
Este nevoie de metoda de microseparare pentru a izola direct celulele individuale sau indivizii individuali din populații mixte pentru cultură pentru a obține o cultură pură. Pentru microorganismele mai mari, un singur individ poate fi extras folosind un capilar. Pentru microorganismele cu indivizi relativ mici, este necesar un micromanipulator pentru a alege celule sau spori microbieni unici cu un capilar sau microac, cârlig, buclă etc. la microscop pentru a obține o cultură pură. Metoda de separare cu o singură celulă are cerințe relativ ridicate privind tehnologia de operare.
Cultura microbiană
1. În funcție de necesitatea de oxigen în timpul culturii, acesta poate fi împărțit în două categorii: cultura aerobă și cultura anaerobă.
Cultura aerobă: cunoscută și sub denumirea de „cultură aerobă”. Adică, atunci când acest microorganism este cultivat, are nevoie de oxigen pentru a fi adăugat, altfel nu va crește bine. In laborator se obtin culturi inclinate prin obtinerea de aer steril din exterior prin dopuri de bumbac. Cea mai mare parte a culturii lichide din balonul Erlenmeyer este agitată de un agitator, astfel încât aerul exterior să poată pătrunde continuu în sticlă.
Cultura anaerobă: Cunoscută și sub denumirea de „cultură anaerobă”. Astfel de microorganisme nu au nevoie de oxigen pentru a participa la cultivare. În procesul de cultivare a microorganismelor anaerobe, cel mai important punct este eliminarea oxigenului din mediu.
2. După starea fizică a mediului, acesta poate fi împărțit în două categorii: cultură solidă și cultură lichidă.
Cultură solidă: este o metodă de inoculare a tulpinilor într-un mediu solid liber și bogat în nutrienți și de cultivare a microorganismelor în condiții adecvate.
Cultura lichidă: În experimente, cultura lichidă poate face ca microorganismele să se înmulțească rapid și să obțină un număr mare de culturi. În anumite condiții, este, de asemenea, o metodă eficientă pentru microorganisme de a selecta și de a îmbogăți bacteriile.
BKMAM biotech furnizează consumabile de laborator corespunzătoare pentru cultura microbiană:
Vase Petri rotunde/pătrate din plastic de unică folosință:
lMaterial din polistiren de înaltă transparență (PS);
l Suprafața este netedă și plană și nu există nicio distorsiune optică a celulelor sub observația la microscop;
l Designul de stivuire facilitează stivuirea și depozitarea;
l Sterilizarea cu oxid de etilenă (EO);
l Rezistență la uzură și coroziune.
Baton/buclă de inoculare din plastic de unică folosință:
material polistiren (PS);
Anti-poluare, fără endotoxine, DNază, RNază și pirogeni;
Ambalajul independent a fost sterilizat;
Manopera fina si specificatii complete;
Distribuitor de celule din plastic de unică folosință, distribuitor de bacterii:
material polistiren (PS);
Anti-poluare, fără endotoxine, DNază, RNază și pirogeni;
Design în formă de L, ușor de utilizat;
Utilizare unică, ușoară și convenabilă.
Plăci cu specificații din oțel inoxidabil/sterile de unică folosință:
Plăcuța cu specificații din oțel inoxidabil este fabricată din oțel inoxidabil, iar placa cu specificații de unică folosință este fabricată din polipropilenă alimentară (PP).
Anti-poluare, fără endotoxine, DNază, RNază și pirogeni;
Zona de pete este strict standardizată
O parte a plăcii cu specificații este echipată cu un mâner, care este ușor de operat
Pachet unic sigilat steril pentru a evita contaminarea secundară a prelevării și eroarea rezultatelor
Utilizare unică pentru a evita contaminarea încrucișată și pentru a reduce volumul de muncă
Bine ați venit să cooperați cu noi
Cu sinceritate
Michael Peng
michael@bkmbio.com