ELISA cu rezultat prost?Urmați-ne pentru a alege farfuria Elisa corectă.
Alegerea unei plăci ELISA adecvate este primul pas către un experiment ELISA de succes, dar mulți oameni ignoră acest lucru. Când oamenii fac experimente, de multe ori iau în considerare doar experimentul în sine, dar nu știu că produsul are adesea un impact mare asupra experimentului. Selectarea corectă a produselor va contribui la succesul experimentului. De obicei, luăm în considerare următorii factori atunci când efectuăm experimente ELISA:
1.Forma fundului
În prezent, producătorii proiectează godeurile marcate cu enzime ca coloane independente și măresc în mod corespunzător distanța dintre godeuri, astfel încât acestea să poată fi separate independent, reducând astfel la minimum contaminarea încrucișată. Diferite tipuri de plăci Elisa au forme diferite ale fundului puțului. Iată câteva forme comune ale fundului găurilor:
Fund plat: fundul este orizontal, numit și fund F. Lumina nu va fi deviată prin fund, care poate transmite lumina în cea mai mare măsură. Utilizați pentru experimente care necesită un fund rotund din motive de vizibilitate sau din alte motive.
Fund rotund: Cunoscut și sub denumirea de fund în U, oferă cele mai bune rezultate de curățare și performanță hibridă, potrivite pentru aplicațiile care necesită testarea sedimentelor.
C-bottom: Poate oferi un efect de curățare bun între fundul plat și fundul rotund, combinând în același timp avantajele fundului plat.
Cone Fund: Cunoscut și sub denumirea de V-bottom, este potrivit pentru prelevarea precisă și stocarea microprobelor pentru recuperarea optimă a volumelor mici.
2. Culoarea farfurii Elisa
Există trei culori ale farfurii Elisa: transparent, alb și negru.
Majoritatea ELISA aleg plăci transparente ca materiale experimentale. Plăcile Elisa albe și negre sunt utilizate în general pentru detectarea luminiscenței. Placa ELISA neagră în sine absoarbe lumina, astfel încât semnalul său este mai slab decât cel al plăcii ELISA albe. Plăcile Elisa negre sunt în general folosite pentru a detecta lumina mai puternică, cum ar fi detectarea fluorescenței; dimpotrivă, plăcile albe Elisa pot fi utilizate pentru detectarea luminii mai slabe și sunt adesea folosite pentru chemiluminiscența generală și dezvoltarea culorii substratului (cum ar fi luciferaza duală). analiza genelor reporter).
3. Materialul plăcii Elisa
Materialele comune sunt polietilena (PE), polipropilena (PP), polistirenul (PS), clorură de polivinil (PVC) și policarbonatul (PC).
Cele mai utilizate materiale în ELSIA sunt polistirenul și clorura de polivinil. Placa moale din clorură de polivinil este subțire, poate fi tăiată, iar prețul este mic. Dezavantajul este că finisajul nu este la fel de bun ca placa de polistiren, iar fundul găurii nu este la fel de plat ca polistirenul. Dar și valoarea de fundal corespunzătoare va crește. De obicei, tratamentul de grefare cu ioni se efectuează pe suprafața plăcii ELISA, iar grupele funcționale active, cum ar fi grupările aldehide, grupările amino și grupările epoxidice sunt introduse în suprafața polimerului pentru a îmbunătăți performanța suprafeței substratului.
4. diferite mecanisme de legare
Legarea eficientă a materialului de acoperire de suprafața inferioară a plăcii este o etapă crucială în ELISA. Prin urmare, caracteristicile structurale și proprietățile chimice ale substanței care trebuie acoperite trebuie analizate cu atenție înainte de experiment pentru a selecta o placă Elisa adecvată. În general, există mai multe modalități de a lega materialul de acoperire de fundul plăcii: adsorbție pasivă, legarea covalentă și captarea afinității.
Adsorbția pasivă: Mecanismul de adsorbție pasivă este complex, iar legarea dintre materialul de acoperire și fundul plăcii se bazează în principal pe forțele intermoleculare (forța van der Waals) și pe legăturile de hidrogen. În majoritatea ELISA, legarea substanței de acoperire la fundul plăcii este realizată prin adsorbție pasivă. În general, legarea dintre antigenele (sau anticorpii) cu greutate moleculară medie și mare și partea inferioară a plăcii este realizată prin adsorbție pasivă. Caracteristicile hidrofobe/hidrofile ale suprafeței inferioare a plăcii sunt adesea luate în considerare atunci când se selectează o placă Elisa. Următorul tabel listează domeniul de aplicare și utilizarea diferitelor suprafețe de substrat hidrofile:
hidrofil | Obligatoriu prioritar | Utilizarea principală |
- | Molecule care conțin regiuni hidrofobe semnificative, cum ar fi: lipide, lipoproteine, proteine mari | Antigen ELISA, FlA, LIA |
la care se adauga | Biomolecule cu proprietăți hidrofile/hidrofobe precum: proteine medii până la mari, imunoglobuline, albumină | ELISA Sandwich cu anticorp dublu, ELISA antigen |
plus plus | Biomolecule cu proprietăți hidrofile/hidrofobe precum: proteine mici spre mari, imunoglobuline, albumină, LPS, proteine fosforilate, glicoproteine | Anticorp dublu ELISA, FIA, LIA |
plus plus plus | Glicoproteine, molecule de lipide polare, fosfolipide, cardiolipide | ELISA antigenului |
Captura de afinitate: Captura de afinitate se bazează pe legarea specifică a macromoleculelor marcate de receptorii corespunzători acestora. Macromoleculele marcate pot fi obținute fie prin cuplare chimică, fie prin inginerie genetică.
Caracteristicile Affinity Capture sunt:
1.specificitate ridicată
2.Poate îmbunătăți raportul semnal-zgomot al rezultatelor măsurătorilor
Cele mai comune suprafețe de fund ale puțului sunt: suprafața acoperită cu streptavidină (streptavidină); Suprafață acoperită cu chelat de nichel (Chelat de nichel) și suprafață acoperită cu glutation (Glutation, GSH).
3. Suprafața streptavidinei: afinitatea și specificitatea ridicate ale streptavidinei și biotinei sunt utilizate pentru a realiza legarea plăcii de fund de proteina acoperită.
4. Suprafața chelatului de nichel: Chelatul de nichel este atașat la suprafața polimerului pentru a lega proteinele de fuziune cu etichetele His (histidină).
5. Suprafața glutationului: Utilizarea specificității enzimatice și a substratului între glutation și glutation sulfhidriltransferază (GST) pentru a realiza legarea plăcii inferioare de proteina de acoperire.
De ce să alegeți placa BKMAM Elisa?
Fabricat din material 100% polistiren,
Potrivit pentru culturi celulare aderente,
Bază plată, grosime uniformă și dimensiune uniformă pentru polii de reacție,
Steril cu pachet individual,
Calitate înaltă cu preț de fabrică.
